L'analyse d'image pour la quantification histologique et le marquage par immunoflurescence de peau ex vivo et de culture de cellules cutanées / Roger L. McMullen in INTERNATIONAL JOURNAL OF COSMETIC SCIENCE, Vol. 32, N° 2 (04/2010)  

[article]  inINTERNATIONAL JOURNAL OF COSMETIC SCIENCE > Vol. 32, N° 2 (04/2010) . - p. 143-154 Titre : L'analyse d'image pour la quantification histologique et le marquage par immunoflurescence de peau ex vivo et de culture de cellules cutanées Type de document : texte imprimé Auteurs : Roger L. McMullen, Auteur ; E. Bauza, Auteur ; C. Gondran, Auteur ; G. Oberto, Auteur ; Nouha Domloge, Auteur ; C. Dal Farra, Auteur ; David J. Moore, Auteur Année de publication : 2010 Article en page(s) : p. 143-154 Note générale : Bibliogr. Langues : Anglais (eng) Catégories : Fibroblastes Imagerie (technique) Kératinocytes Les kératinocytes sont des cellules constituant 90 % de la couche superficielle de la peau (épiderme) et des phanères (ongles, cheveux, poils, plumes, écailles). Ils synthétisent la kératine (kératinisation), une protéine fibreuse et insoluble dans l'eau, qui assure à la peau sa propriété d'imperméabilité et de protection extérieure. L'épiderme est divisé en 4 couches basées sur la morphologie des kératinocytes (de l'intérieur vers l'extérieur) : 1. stratum germinativum (couche basale à la jonction avec le derme) 2. stratum spinosum 3. stratum granulosum 4. stratum lucidum 5. stratum corneum Les kératinocytes passent progressivement de la couche basale vers les couches supérieures par différenciation cellulaire jusqu'au stratum corneum ou ils forment une couche de cellules mortes nommées squames, par apoptose. Cette couche constitue une barrière de protection et réduit la perte d'eau de l'organisme. Les kératinocytes sont en perpétuel renouvellement. Ils mettent environ 1 mois pour aller de la couche basale au stratum corneum mais ce processus peut être accéléré en cas d'hyperprolifération de kératinocyte (psoriasis). Microscopie de fluorescence Peau -- Histologie Index. décimale : 668.5 Parfums et cosmétiques Résumé : Les techniques d'analyse d'images se sont développées pour la quantification de microphotographies obtenues par microscopie classique ou à fluorescence. Les substrats examinés étaient soit des cultures de cellules, telles que les kératinocytes humains normaux ou les fibroblastes, soit des sections de peau ex vivo. Des exemples d'analyses sont fournis pour la comparaison d'échantillons traités avec des ingrédients versus un placebo afin de démontrer l'utilité de ces méthodes pour quantifier et fournir des données numériques à partir d'éléments jusqu'ici de nature qualitative et fondés sur l'observation d'un histologiste. Les essais quantitatifs discutés comprennent : la coloration Fontana Masson pour l'expression des mélanines; la coloration au rouge Nil pour la détection d'inclusions lipidiques; le marquage nucléaire avec le DAPI; et le marquage par immunofluorescence de l'expression des protéines avec un anticorps primaire dirigé contre la protéine (antigène) et un anticorps secondaire marqué par fluorescence (Alexa Fluor 488) contre l'anticorps primaire. DOI : 10.1111/j.1468-2494.2010.00541.x En ligne : https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/j.1468-2494.2010.00541.x Format de la ressource électronique : Pdf Permalink : https://e-campus.itech.fr/pmb/opac_css/index.php?lvl=notice_display&id=8778 [article]

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Evaluation of THP-1 cell line as an in vitro model for long-term safety assessment of new molecules / Imane Garcia in INTERNATIONAL JOURNAL OF COSMETIC SCIENCE, Vol. 35, N° 6 (12/2013)  

[article]  inINTERNATIONAL JOURNAL OF COSMETIC SCIENCE > Vol. 35, N° 6 (12/2013) . - p. 568-574 Titre : Evaluation of THP-1 cell line as an in vitro model for long-term safety assessment of new molecules Type de document : texte imprimé Auteurs : Imane Garcia, Auteur ; C. Pouzet, Auteur ; M. Brulas, Auteur ; E. Bauza, Auteur ; Jean-Marie Botto, Auteur ; Nouha Domloge, Auteur Année de publication : 2013 Article en page(s) : p. 568-574 Note générale : Bibliogr. Langues : Anglais (eng) Catégories : Cellules -- Cultures et milieux de culture Cosmétiques -- Aspect sanitaire Culture in vitro Produits chimiques -- Suppression ou remplacement Tests de sécurité Toxicologie cellulaire Toxicologie génétique Index. décimale : 668.5 Parfums et cosmétiques Résumé : Objectifs : La surveillance de la toxicité subaiguë et chronique est essentielle lors du développement de nouvelles molécules cosmétiques. Compte tenu du manque de méthodes alternatives validées, nous avons développé un modèle de cytotoxicité à doses réitérées in vitro sur cellules TPH-1. Methodes : Cultivées en suspension, les cellules ont été traitées avec des produits chimiques pendant 14 jours, à raison de 3 applications par semaine, et le taux de viabilité cellulaire a été déterminé par le test MTT. Nous avons commencé par étudier les effets à long terme de produits chimiques induisant différents degrés de cytotoxicité : le Paraquat, le 3-acide nitropropanoique (3-NPA) et le dodecyl sulfate de sodium (SDS). A partir d'une étude de cytotoxicité aigüe, des doses comprises entre 1 et 10 μg ml−1 ont donc été choisis pour réaliser notre étude de cytotoxicité subaigüe. Une étude comparative du potentiel genotoxique du Paraquat et du peroxyde d'hydrogène (H2O2) a été menée sur les cellules TPH-1. Plusieurs tests des comètes ont été réalisés : à 1 h (4°C), après une période de récupération de 24 h (37°C) et après un traitement de 14 jours (37°C). Une fois adapté pour tester des extraits végétaux ou de molécules fortement diluées, certains de nos produits cosmétiques ont été testé avec ce model. Resultats : Comme pressentie, après 14 jours de traitement au Paraquat, le taux de viabilité cellulaire a fortement diminué pour des doses supérieures à 3 μg ml−1, alors que 10 μg ml−1 de 3-NPA ou de SDS n'induisaient pas plus de 44 % de mortalité cellulaire. Etonnamment, les résultats des tests des comètes ont montrés que les "tails moments" dus à l'H2O2 restent stables, alors que ceux liés au Paraquat augmentent de manière "dose-dépendante". D'autre part tous les composés testés entre 0.5 et 5 μg ml−1 ont été classés comme inoffensifs et ceci même avec un seuil placé à 90% de viabilité cellulaire. Conclusions : En conclusion, ce test pourrait présenter un intérêt pour l'étude de cytotoxicité subaigüe et génotoxique des produits appliqués quotidiennement et suggère que le Paraquat en serait un contrôle positif de choix. Note de contenu : - MATERIALS AND METHODS : Cell culture maintenance - Cell viability assessment after acute cytotoxicity assay - Cell viability assessment after subacute cytotoxicity assay - Comet assay after 1h of exposure at 4°C - Comet assay after 24h or 14 days of exposure at 37°C - Statistical analysis - RESULTS : Determination of dose levels to use for the subacute cytotoxicity assay on THP-1 cells - Cell viability after subacute cytotoxicity assay on THP-1 cells - Evaluation of Paraquat's genotoxic potential after long-term exposure - Cell stability study for THP-1 cells cultured in salt equilibrated medium - Subacute cytotoxicity evaluation of soluble active ingredients DOI : 10.1111/ics.12078 En ligne : http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/ics.12078 Format de la ressource électronique : Pdf Permalink : https://e-campus.itech.fr/pmb/opac_css/index.php?lvl=notice_display&id=19918 [article]

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