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An optimized method for intensive screening of molecules that stimulate B-defensin 2 or 3 (hBD2 or hBD3) expression in cultured normal human keratinocytes / I. Pernet in INTERNATIONAL JOURNAL OF COSMETIC SCIENCE, Vol. 27, N° 3 (06/2005)
[article]
Titre : An optimized method for intensive screening of molecules that stimulate B-defensin 2 or 3 (hBD2 or hBD3) expression in cultured normal human keratinocytes Type de document : texte imprimé Auteurs : I. Pernet, Auteur ; J. Guesnet, Auteur ; J. Viac, Auteur ; A. Guezennec, Auteur ; Corinne Reymermier, Auteur ; E. Perrier Année de publication : 2005 Article en page(s) : p. 161-170 Note générale : Bibliogr. Langues : Anglais (eng) Tags : B-defensin Cytokine Keratinocyte Screening Vegetal extract Index. décimale : 668.5 Parfums et cosmétiques Résumé : La peau humaine normale exerce une fonction barrière contre l'intrusion de microorganismes par la production de peptides antibiotiques comme les défensines. Le but de cette étude a consisté à mettre au point un modèle de culture de kératinocytes humains normaux permettant une détection optimale des ARNm des défensines en général, et adapté au screening de molécules aptes à stimuler les défensines épidermiques hBD2 et hBD3 en particulier, sans induire de cytokines pro-inflammatoires. Un modèle de culture de kératinocytes en plaques 96 puits, en milieu riche en calcium (1,7 mm) permet une analyse de l'expression des ARNm de hBD2 et hBD3 en condition basale et après stimulation par divers extraits végétaux. La sécrétion d'IL-8 et de la chimiokine MIP-3a ; a été évaluée dans les surnageants de culture par ELISA. Parmi les 184 extraits testés, 75 montrent un effet stimulant sur l'expression des B-défensines : 40 ont un effet sur hBD2, 26 sur hBD3 et 9 sur les 2 types de défensines. Quinze de ces actifs qui induisent aussi la sécrétion de cytokines pro-inflammatoires ont été éliminés. Parmi les autres molécules, 4 ont été sélectionnées pour faire l'objet d'une étude de leurs effets-doses (n = 4) sur l'expression des B-défensines par une technique quantitative de RT-PCR en temps réel. Cette étude est complétée par le dosage des cytokines IL-1a ;, IL-8 et MIP-3a ;. Les résultats obtenus soulignent l'importante nécessitée de contrôler au moins trois fois par une méthode quantitative les résultats d'un screening. Cette nouvelle méthode de screening intensif nous a permis de mettre en évidence des extraits végétaux capables de stimuler les défensines épidermiques sans induire de cytokines pro-inflammatoires. DOI : 10.1111/j.1467-2494.2005.00262.x En ligne : https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/j.1467-2494.2005.00262.x Format de la ressource électronique : Permalink : https://e-campus.itech.fr/pmb/opac_css/index.php?lvl=notice_display&id=4434
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