Insulin–transferrin–selenium as an alternative to foetal serum for epidermal equivalents / C. Mainzer in INTERNATIONAL JOURNAL OF COSMETIC SCIENCE, Vol. 36, N° 5 (10/2014)  

[article]  inINTERNATIONAL JOURNAL OF COSMETIC SCIENCE > Vol. 36, N° 5 (10/2014) . - p. 427-435 Titre : Insulin–transferrin–selenium as an alternative to foetal serum for epidermal equivalents Type de document : texte imprimé Auteurs : C. Mainzer, Auteur ; C. Barrichello, Auteur ; R. Debret, Auteur ; Noëlle Remoué, Auteur ; D. Sigaudo-Roussel, Auteur ; P. Sommer, Auteur Année de publication : 2014 Article en page(s) : p. 427-435 Note générale : Bibliogr. Langues : Anglais (eng) Catégories : Cellules -- Cultures et milieux de culture Insuline L'insuline (du latin : insula « île ») est une hormone peptidique sécrétée par les cellules β des îlots de Langerhans du pancréas. Elle a, avec le glucagon, un rôle majeur dans la régulation des substrats énergétiques, dont les principaux sont le glucose, les acides gras et les corps cétoniques. Peau -- Physiologie Peau artificielle Sélénium Tests de sécurité Transferrine La transferrine ou sidérophiline est une bêta globuline, de poids moléculaire 76 kDa, synthétisée par le foie; elle est constituée d'une seule chaîne polypeptidique porteuses de 2 sites de captation du fer, à raison de 2 atomes de fer par molécule de transferrine. La fonction de la transferrine est le transport du fer de l'intestin vers les réserves hépatiques et vers les réticulocytes. L’ovotransferrine est la transferrine principale de l'albumen de l'Å“uf et était appelée autrefois conalbumine. Index. décimale : 668.5 Parfums et cosmétiques Résumé : Objectif : Les modèles de peaux reconstruites sont des outils performants pour l'étude des mécanismes mis en jeu au cours du développement, du vieillissement et de pathologies. Ces modèles ont connu diverses adaptations et perfectionnements avec notamment l'implémentation de plusieurs types cellulaires. Pour répondre aux contraintes du développement d'une peau reconstruite in vitro, le milieu de culture nécessite d'être réfléchi avec soin. Le facteur le plus répandu est le sérum de veau fÅ“tal (SVF) qui présente la composition la plus complète et permet d'apporter en une fois les facteurs de croissance, les vitamines, les hormones et d'autres éléments circulant. Cependant sa composition varie d'un lot à l'autre au détriment de la reproductibilité expérimentale, et son origine animale peut poser des problèmes éthiques. De plus, ses activités biologiques peuvent le rendre incompatible avec l'étude de certaines voies de signalisation. Dans cette étude, nous présentons une stratégie d'épiderme reconstruit élaboré à partir d'un milieu défini sans sérum. Méthodes : Nous avons élaboré un épiderme reconstruit à partir de kératinocytes humains primaires cultivés dans un milieu supplémenté avec le cocktail Insuline-Transferrine-Sélénium (ITS). Nous avons ensuite comparé notre modèle de référence, une co-culture de kératinocytes et de fibroblastes en milieu supplémenté en SVF, avec ce nouveau modèle et attesté de sa légitimité en déterminant l'expression de marqueurs caractéristiques des kératinocytes par PCR en temps réel et par immunofluorescence. Résultats : Les résultats montrent que le cocktail ITS engendre des profils d'expression des marqueurs de prolifération et de différenciation, aux niveaux transcriptomique et protéique, similaires au milieu avec SVF. Conclusion : Nous avons démontré que le milieu supplémenté en ITS est une alternative valable à l'utilisation de SVF dans l'élaboration de modèles d'épidermes reconstruits, ouvrant ainsi le chemin vers l'étude des voies de signalisation. Note de contenu : - MATERIALS AND METHODS : 1.Cell culture; 2.In vitro reconstructed epidermis; 3. Measurement of cell proliferation (using Cell Trade Violet) and cell viability in FACS; 4.RNA extraction, reverse transcription and quantitative PCR; 5.Histology and Immunofluorescence; 6.Quantification of epidermal thickness; 7.Statistical analysis - RESULTS : 1.Characterization of FBS- and ITS-containing media on keratinocyte proliferation; 2.Effect of a serum-free medium on the structure of an epidermal co-culture model; 3.Effect of a serum-free medium on the structure of a fibroblast-free epidermal model; 4.Comparaison of selected gene expression in the co-culture model and the insulin model DOI : 10.1111/ics.12141 En ligne : http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/ics.12141 Format de la ressource électronique : Pdf Permalink : https://e-campus.itech.fr/pmb/opac_css/index.php?lvl=notice_display&id=21996 [article]

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