Development of an in vitro model of menopause using primary human dermal fibroblasts / Noëlle Remoué in INTERNATIONAL JOURNAL OF COSMETIC SCIENCE, Vol. 35, N° 6 (12/2013)  

[article]  inINTERNATIONAL JOURNAL OF COSMETIC SCIENCE > Vol. 35, N° 6 (12/2013) . - p. 546-554 Titre : Development of an in vitro model of menopause using primary human dermal fibroblasts Type de document : texte imprimé Auteurs : Noëlle Remoué, Auteur ; J. Molinari, Auteur ; E. Andres, Auteur ; J. C. Lago, Auteur ; C. Barrichello, Auteur ; P. L. Moreira, Auteur Année de publication : 2013 Article en page(s) : p. 546-554 Note générale : Bibliogr. Langues : Anglais (eng) Catégories : Cellules -- Cultures et milieux de culture Collagène Culture in vitro Dermo-cosmétologie Fibroblastes Ménopause Vieillissement cutané Index. décimale : 668.5 Parfums et cosmétiques Résumé : Objectif : Afin de remédier au manque de modèles in vitro qui reproduisent spécifiquement l'effet du vieillissement hormonal sur la peau des femmes, et à la recherche d'actifs à l'efficacité innovante pour les soins cosmétiques, nous avons développé un modèle cellulaire simulant le déclin hormonal de la ménopause, et évalué plusieurs paramètres du métabolisme du collagène. Methodes : Des fibroblastes dermiques humains ont été cultivés avec un milieu contenant des hormones sexuelles et facteurs de croissance (17β-oestradiol, progestérone, dehydroepiandrosterone, GH, IGF-1) dans un premier temps aux concentrations sanguines des femmes non-ménopausées, puis aux concentrations constatées pendant la ménopause. Nous avons mesuré la prolifération cellulaire (par MTT), le relargage de MMP-1 et MMP-3 (par ELISA), le dépôt de collagène total (par coloration au Sirius Red), le dépôt de collagène de type I et III (par ELISA), et l'expression génique du procollagène de type I et III (par qPCR). Resultats : Après l'incubation en conditions ménopausées, les résultats ont montré une diminution significative de la prolifération cellulaire, du dépôt de collagène total et du ratio de collagène type III/type I, ainsi qu'une augmentation des MMP. Ces observations sont en accord avec les précédentes études in vivo de la peau des femmes ménopausées. Cependant, l'expression génique du procollagène en conditions ménopausées n'a été réduite que dans les premières heures, pour ensuite être supérieure à celle des cellules cultivées en conditions non-ménopausées. Conclusion : Nos résultats ont montrés que, dans les conditions ménopausées, l'expression accrue du procollagène n'a pas suffi à compenser les effets cataboliques des MMP et/ou l'altération du processus de maturation du procollagène, entrainant ainsi une diminution du dépôt de collagène. Ces résultats contribuent à la compréhension générale du comportement hormono-dépendant de la peau et mettent en évidence l'application potentielle de ce modèle in vitro aux tests d'efficacité anti-âge d'actifs cosmétiques destinés aux femmes ménopausées pour le maintien du métabolisme collagénique et de l'équilibre des types de collagènes responsable des propriétés mécaniques du derme. Note de contenu : - MATERIALS AND METHODS : Cells - Active compounds and media - Cell culture - Anti-ageing efficacy testing - Total insoluble collagen deposition assay - Enzyme-linked immunosorbent assay assays of insoluble type I and III collagen - Cell proliferation - Matrix metalloproteinase-1 and metalloproteinase-3 release - RNA isolation and cDNA syntheis - Real-time quantitative polymerase chain reaction - Statistical analysis - RESULTS AND DISCUSSION : Adjustment of duration of the collagen stimulation phase (step 2) - Starvation phase (step 3) - In vitro simulation of menopause (step 4) - In vitro model for testing the efficacy of anti-ageing actives DOI : 10.1111/ics.12075 En ligne : http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/ics.12075 Format de la ressource électronique : Pdf Permalink : https://e-campus.itech.fr/pmb/opac_css/index.php?lvl=notice_display&id=19915 [article]

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Insulin–transferrin–selenium as an alternative to foetal serum for epidermal equivalents / C. Mainzer in INTERNATIONAL JOURNAL OF COSMETIC SCIENCE, Vol. 36, N° 5 (10/2014)  

[article]  inINTERNATIONAL JOURNAL OF COSMETIC SCIENCE > Vol. 36, N° 5 (10/2014) . - p. 427-435 Titre : Insulin–transferrin–selenium as an alternative to foetal serum for epidermal equivalents Type de document : texte imprimé Auteurs : C. Mainzer, Auteur ; C. Barrichello, Auteur ; R. Debret, Auteur ; Noëlle Remoué, Auteur ; D. Sigaudo-Roussel, Auteur ; P. Sommer, Auteur Année de publication : 2014 Article en page(s) : p. 427-435 Note générale : Bibliogr. Langues : Anglais (eng) Catégories : Cellules -- Cultures et milieux de culture Insuline L'insuline (du latin : insula « île ») est une hormone peptidique sécrétée par les cellules β des îlots de Langerhans du pancréas. Elle a, avec le glucagon, un rôle majeur dans la régulation des substrats énergétiques, dont les principaux sont le glucose, les acides gras et les corps cétoniques. Peau -- Physiologie Peau artificielle Sélénium Tests de sécurité Transferrine La transferrine ou sidérophiline est une bêta globuline, de poids moléculaire 76 kDa, synthétisée par le foie; elle est constituée d'une seule chaîne polypeptidique porteuses de 2 sites de captation du fer, à raison de 2 atomes de fer par molécule de transferrine. La fonction de la transferrine est le transport du fer de l'intestin vers les réserves hépatiques et vers les réticulocytes. L’ovotransferrine est la transferrine principale de l'albumen de l'Å“uf et était appelée autrefois conalbumine. Index. décimale : 668.5 Parfums et cosmétiques Résumé : Objectif : Les modèles de peaux reconstruites sont des outils performants pour l'étude des mécanismes mis en jeu au cours du développement, du vieillissement et de pathologies. Ces modèles ont connu diverses adaptations et perfectionnements avec notamment l'implémentation de plusieurs types cellulaires. Pour répondre aux contraintes du développement d'une peau reconstruite in vitro, le milieu de culture nécessite d'être réfléchi avec soin. Le facteur le plus répandu est le sérum de veau fÅ“tal (SVF) qui présente la composition la plus complète et permet d'apporter en une fois les facteurs de croissance, les vitamines, les hormones et d'autres éléments circulant. Cependant sa composition varie d'un lot à l'autre au détriment de la reproductibilité expérimentale, et son origine animale peut poser des problèmes éthiques. De plus, ses activités biologiques peuvent le rendre incompatible avec l'étude de certaines voies de signalisation. Dans cette étude, nous présentons une stratégie d'épiderme reconstruit élaboré à partir d'un milieu défini sans sérum. Méthodes : Nous avons élaboré un épiderme reconstruit à partir de kératinocytes humains primaires cultivés dans un milieu supplémenté avec le cocktail Insuline-Transferrine-Sélénium (ITS). Nous avons ensuite comparé notre modèle de référence, une co-culture de kératinocytes et de fibroblastes en milieu supplémenté en SVF, avec ce nouveau modèle et attesté de sa légitimité en déterminant l'expression de marqueurs caractéristiques des kératinocytes par PCR en temps réel et par immunofluorescence. Résultats : Les résultats montrent que le cocktail ITS engendre des profils d'expression des marqueurs de prolifération et de différenciation, aux niveaux transcriptomique et protéique, similaires au milieu avec SVF. Conclusion : Nous avons démontré que le milieu supplémenté en ITS est une alternative valable à l'utilisation de SVF dans l'élaboration de modèles d'épidermes reconstruits, ouvrant ainsi le chemin vers l'étude des voies de signalisation. Note de contenu : - MATERIALS AND METHODS : 1.Cell culture; 2.In vitro reconstructed epidermis; 3. Measurement of cell proliferation (using Cell Trade Violet) and cell viability in FACS; 4.RNA extraction, reverse transcription and quantitative PCR; 5.Histology and Immunofluorescence; 6.Quantification of epidermal thickness; 7.Statistical analysis - RESULTS : 1.Characterization of FBS- and ITS-containing media on keratinocyte proliferation; 2.Effect of a serum-free medium on the structure of an epidermal co-culture model; 3.Effect of a serum-free medium on the structure of a fibroblast-free epidermal model; 4.Comparaison of selected gene expression in the co-culture model and the insulin model DOI : 10.1111/ics.12141 En ligne : http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/ics.12141 Format de la ressource électronique : Pdf Permalink : https://e-campus.itech.fr/pmb/opac_css/index.php?lvl=notice_display&id=21996 [article]

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